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人白細胞介素-28ELISA檢測
發(fā)布時間： 2012-09-07 點擊次數(shù)： 1135次人白細胞介素-28ELISA檢測
本試劑盒僅供研究使用 標本：血清或者血漿
二、注意事項
1. 此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
使用前應將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶后，請于37℃孵育15分鐘。
濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結晶后，請于37℃孵育15分鐘
若24小時內(nèi)進行實驗，標本可存放于2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反復凍融。
在反復清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像。
加樣完畢后，應注意輕微搖動微孔反應條，以便使孔中的液體充分混勻。
試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標示。人白細胞介素-28ELISA檢測
三、實驗前準備
1．使用前應將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準備各種實驗儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
5．用應用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）人白細胞介素-28ELISA檢測
四、操 作 步 驟
1．取出酶標板，設空白孔，依照次序對應分別加入100μl的標準品于空白微孔中（空白孔視為0號標準品，用醫(yī)用蒸餾水替代）
2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘；
4、將酶標板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應用洗滌液后，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
6、重復第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后，室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
11、重復第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。
14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。
15、在酶標儀上，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進行測定。
16、根據(jù)制備的標準曲線，計算樣本含量五、結 果 判 斷
1. 儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值；
2、檢測值范圍：0－400pg/ml
3、敏感度：1.0pg/mlTRAF2/TNF-R2（TNF receptor-associatedfactor 2） 腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體 0.2ml
TRAF3/CD40bp （CD40 binding protein） CD40結合蛋白/CD40受體相關因子1抗體 0.2ml
TRAF6 （TNF receptor-associated factor 6） 腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體 0.2ml
TRAIL/Apo2L （tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand） 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體/凋亡素2配體抗體 0.1ml
TRAIL/Apo2L （tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand） 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體/凋亡素2配體抗體 0.2ml
Mouse IgM 小鼠IgM （免疫親和純化） 1mg
Mouse IgM 小鼠IgM （免疫親和純化） 10mg
pig IgG （親和純化）豬IgG 10mg
pig IgG （親和純化）豬IgG 50mg
Transthyretin （TTR/prealbumin） 轉甲狀腺素蛋白抗體 0.2ml
TRBF1/TRF1 （omeric repeat binding factor 1） 端粒體復制結合因子1抗體 0.2ml
TRF（Transferrin） 抗轉鐵蛋白抗體 0.2ml
TRF2（omere repeat binding factor 2） 端粒結合蛋白2抗體 0.2ml
omerase Binding Protein，P23 端粒酶結合蛋白P23抗體 0.2ml
TRIM32（tripartite motif protein 32） TRIM32抗體 0.2ml
pig IgM （親和純化）豬IgM 10mg
Mink IgG 水貂IgG （親和純化） 1mg
Mink IgG 水貂IgG （親和純化） 10mg
Rabbit IgG 兔IgG（親和層析純化） 10mg
Rabbit IgG 兔IgG（親和層析純化） 50mg
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